检验科标本采集原则
一、病人准备
1.病人状态
一般需在安静状态下采集标本,如患者处于高度紧张的状态时,可使血红蛋白、白细胞增高。由于劳累或受冷等刺激、也可见白细胞的增高。运动能影响许多项目的测定结果。活动的影响可分暂时和持续性两类。暂时性影响如使血浆脂肪酸含量减少;丙氨酸、乳酸含量增高。持续性影响,如激烈运动后使CK、LDH、ALT、AST和GLU等的测定值升高,有些恢复较慢,如ALT在停止运动1h后测定,其值仍可偏高30%~50%。
2.饮食
多数试验要求在采血前禁食12h,因为饮食中的不同成分可直接影响实验结果。
(1) 餐后血液中TG、ALT、GLU、BUN、Na等均可升高,进食高蛋白或高核酸食物,可以引起血中的尿素氮(BUN)和尿酸(UA)的增高。进食高脂肪食物后采集的血液样本,其血清会出现浑浊,可影响许多检验测定的正确性。甚至喝含咖啡的饮料,可引起淀粉酶(AMS)、AST谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)等升高。但空腹时间过长,会使GLU,蛋白质降低,而胆红素升高。
(2) 高脂餐后2~4h采血,多数人ALP含量增高,主要来自肠源性同工酶,且与血型有密切关系,O型或B型兼为Le+分泌型者增高更为明显。
(3) 高蛋白质饮食可使血浆尿素、血氨增加,但不影响肌酐含量。
(4) 高比例不饱脂肪酸食物,可减低胆固醇含量;香蕉、菠萝、番茄可使尿液5-羟色胺增加数倍。
(5) 含咖啡因饮料,可使血浆游离脂肪酸增加,并使肾上腺和脑组织释放儿茶酚胺。食物如含有动物血液,可引起粪隐血假阳性。
(7) 饮酒后使血浆乳酸、尿酸盐、乙醛、乙酸等增加,长期饮酒者高密度脂蛋白胆固醇偏高、平均血细胞体积增加、谷氨酰转肽酶亦较不饮酒的病人为高,甚至可以将这三项作为嗜酒者的筛选检查。
吸烟:瘾大者血液一氧化碳血红蛋白含量可达8%,而不吸烟者含量在1%以下。此外,儿茶酚胺、血清可的松亦较不吸烟者为高,血液学方面亦有变化,白细胞数增加、嗜酸粒细胞减少、中性粒细胞及单核细胞增多、血红蛋白偏高、平均红细胞体积偏高。吸烟组血浆硫氰酸盐浓度明显高于非吸烟组。
3.药物
药物对检验的影响非常复杂,在采样检查之前,以暂停各种药物为宜,如某种药物不可停用,则应了解可能对检验结果产生的影响。庆大霉素、氨芐青霉素可使谷丙转氨酶活性增高、咖啡因可使胆红素增加、维生素C可使血糖、胆固醇、甘油三脂、尿酸严重降低。
4.体位
体位影响血液循环,由于血液和组织间液因体位不同而平衡改变,则细胞成分和大分子物质的改变较为明显,例如由卧位改为站位,血浆ALB、TP、酶、Ca、胆红素、Tch及TG等浓度增高;Hb、HCT、RBC等亦可增加。由于体位的因素,在确立参考值时,应考虑门诊和住院病人可能存在的结果差异,故采集标本时要注意保持正确的体位和保持体位的一致性。
5.时间
病人准备还应考虑病人的生物钟规律,特别是激素水平分析,如女性生殖激素与月经周期密切相关;胆固醇则在经前期最高,排卵时最低;纤维蛋白原在经前期最高,血浆蛋白则在排卵时减少。生长激素于入睡后会出现短时高峰。胆红素、血清铁以清晨最高;血浆蛋白在夜间降低;血Ca往往在中午出现最低值。故采血时间应在相同时间进行。
二、标本采集
标本采集是直接关系检验结果的基本要素,如果标本采集不当,即使最好的仪器设备也难以弥补在采集标本时引入的误差和错误。
现将各种标本的采集要点分述如下:
(一) 血液标本
1.标本采集注意事项:
(1) 采静脉血时止血带结扎过久,可引起误差。如以结扎1min的样品结果为基数,则结扎3min,可使血浆总蛋白增加5%,胆固醇增加5%,铁增加6%,胆红素增加8%,乳酸则不能使用止血带。
(2) 血清标本应避免溶血。许多物质红细胞内和血清中(血浆)的含量是不一样的`。如ALT红细胞内比血清高出数倍。血钾、AST高出几十倍,而HDH则高出百倍以上,一旦溶血,特别是严重溶血,造成血清(浆)中这些物质的测定值增高,干扰测定结果。
(3) 要特别注意采血不能在输液的同侧进行,更应杜绝在输液管内采血,因输液成分会影响检测结果(使相应的结果偏高,如输K+、Glu时,可使所测K+、Glu明显增高),或使血液稀释结果偏低。
细胞培养的样品要采用无菌技术,防止污染。
(4) 标本采集后,必须在试管或容器上帖上检验申请单号码、住院病人应有床号、姓名,且应当场核对无误。
(5) 采血顺序 摘自北京协和医院检验科《检验样本留取及采集指南》
推荐采用直针采血方式,顺序如下:
①血培养管,②凝血项目管(蓝帽),③血沉管(黑帽),④血清管(红帽或黄帽),⑤肝素血浆管(绿帽),⑥EDTA 管(紫帽),⑦ 抑制血糖酵解管(灰帽)
注:采用注射器采集血培养时,厌氧瓶优先。
特殊情况采用蝶翼方式采血,且无血培养管时,顺序如下:
①白帽管(弃置管,也可送检生化免疫项目),②凝血项目管(蓝帽),③血沉管(黑帽),④血清管(红帽或黄毛),⑤肝素血浆管(绿帽),⑥EDTA 管(紫帽),⑦ 抑制血糖酵解管(灰帽)
注:采用蝶翼方式采集血培养时,需氧瓶优先。
在实际工作中,如患者静脉条件较差,有可能采血不足,血培养优先考虑需氧管,其它管应首先考虑凝血(蓝帽)和血沉(黑帽)检测管,因为这两种标本对血量要求最严格,且二者抗凝剂均为枸橼酸钠。
(二) 尿液标本
根据采集时间可分为清晨空腹尿、随机尿、计时尿(2h、3h、12h、24h等)、午后尿、餐后尿、症状典型时尿等。
(1) 晨尿为住院病人留尿的主要方法,早晨起床后收集第一次尿,可用尿常规检验。
(2) 随机尿多为门诊就诊病人的留尿检验方法。
(3) 餐后尿为收集进餐后2h尿,主要用于了解葡萄糖代谢情况,用以筛查隐性糖尿病或轻症糖尿病。
(4) 计时尿应于计时开始时排空尿液,然后于规定时间内至截止时间留尿,计时尿多用于肾功能和有形成分排出率的评估,亦用于计算淀粉酶或肌酐的排出率。
(三) 粪便标本
采集后及时送检,如作原虫阿米巴检查应保持一定的温度,且立即送检,立即检查,如检查蛲虫则不必送检粪样,而应于晨起时排便前用棉拭擦肛门周围,可得虫卵。粪便标本应不污染容器外表,一般以无滤漏容器留取5~10g即可。
(四) 脑脊液、浆膜腔液、关节液
均由临床医师穿刺采样,检验科应提供专用的各种试管或容器,及时送送检。
(五) 痰液标本
采集晨间第一口痰,多用于细胞学及微生物学检查。采样前应先反复漱口,经深呼吸数次后用力咳痰,不可吐入唾液。微生物培养取样应在抗生素等药物治疗开始之前,如已使用用抗菌药物,则应选血液药物浓度最低水平时采样。
(六) 阴道分泌物
由妇产科医师采样后即时送检,否则影响滴虫动力,易于漏检。
(七) 其他标本
根据具体检验项目而定,临床医师在开申请单前,应同检验科相关部门联系并询问详细后,注明检查要求,再采样并及时送检。
总之,各种检验标本的采集合适与否,直接关系检验质量,应予以重视。
三、标本保存和运送
标本保存和运送是检验质量保证的重要环节之一。由于采集的标本受各种因素的影响,可能使检验结果受或大或小的误差,因此必须正确掌握标本保存和运送。标本采集后尽量立即送检,如在室温放置时间过长会造成血液成分的变化(如血糖及酶活性降低),也可造成溶血现象。
(1) 采样后须立即送检的常规项目:血氨、血沉、血气分析、酸性磷酸酶、乳酸以及各种细菌培养,特别是厌氧菌培养。
(2) 采样后0.5h内送检的常规项目:血糖、电解质、血液细胞学、凝血试验、体液细胞学、涂片找细菌、霉菌等。
(3) 采样后1~2 h内送检的常规项目:各种蛋白质类、色素类、激素类、脂类、酶类、抗原、抗体测定等。