化学发光免疫分析法有哪三类
化学发光免疫分析法根据标记物的种类和发光原理的不同,主要可以分为以下三类:
1. 化学发光免疫分析法(CLIA)
特点:
也被称为直接化学发光分析法或非酶促化学发光免疫分析法。
该方法利用化学发光试剂(如鲁米诺类与吖啶酯类)直接标记抗原或抗体。
发光试剂在发光过程中会消耗标记物,导致发光时间较短,属于闪光型发光,因此通常只能进行一次测量,且重复性较差。
应用:
由于其高灵敏度和特异性,广泛应用于各种抗原、抗体、激素等物质的检测。
2. 化学发光酶免疫分析法(CLEIA)
特点:
从标记免疫分析的角度看,CLEIA应属于酶免疫分析,但其酶反应的底物是发光剂。
操作步骤包括首先用酶对生物活性物质进行标记,然后进行免疫反应产生复合物,复合物上的酶再作用于发光底物,最后通过测定发光信号来进行定性或定量分析。
应用:
常用于提高发光信号的强度和稳定性,从而提高检测的灵敏度。
3. 电化学发光免疫分析法(ECLIA)
特点:
以电化学发光剂(如三联吡啶钌)作为示踪物质标记抗原或抗体。
采用纳米微球为固相载体的分离方式,以三丙胺作为电子供体。
通过电场作用诱导结合标记物发光,发光强度与被测物质的浓度呈线性关系,从而实现超微量物质的定量分析。