sds聚丙烯酰胺凝胶电泳中sds的作用
蛋白质变性和解离,确定蛋白质的相对分子质量等作用。
1、SDS能够与蛋白质相互作用,使蛋白质变性并解离成单个的亚单位。SDS通过与蛋白质中的疏水区域相互作用,将蛋白质展开成线性结构,并给予蛋白质一个负电荷。由于SDS的疏水链与蛋白质的疏水区域相互作用更强,SDS会覆盖在蛋白质表面,使蛋白质带有负电荷。这样,蛋白质在电场中会根据其分子量的不同而在凝胶中移动,从而实现蛋白质的分离。
2、由于SDS与蛋白质的质量比例是固定的,即每个SDS分子与约2.7个氨基酸残基结合,因此,通过SDS-PAGE可以根据蛋白质在凝胶中的迁移距离,推断出蛋白质的相对分子质量。由于SDS使蛋白质带有负电荷,蛋白质在电场中的迁移速度与其相对分子质量成反比。因此,较大分子量的蛋白质会迁移得更慢,较小分子量的蛋白质会迁移得更快。