如何在ncbi中blast引物的特异性

打开浏览器，输入进入NCBI网站。

在此网页下方处找到Primer-BLAST，点击进入。

点击进入以下界面，在Primer Parameters里面输入自己已经设计好的引物序列。

随后，在Primer Pair Specificity Checking Parameters里面的Databse中选择选项“Genome（chromosomes from all organisms）”。

之后直接点击页眉左下角的“Get Primers”按钮进行引物特异性的验证。

注意：输入自己设计好的引物时，注意引物的顺序是不是5'端至3‘端