链终止法测序dna的基本过程？

链终止法测序（Sanger测序）是一种常用的DNA测序方法，以下是其基本过程：

DNA模板准备：首先，需要获得待测序的DNA样本并纯化。通常使用PCR或细菌培养等方法扩增DNA片段，以获取足够的模板。然后，通过热变性使得DNA变成单链。

标记引物合成：在DNA模板的末端，使用DNA聚合酶和二进制核苷酸（ddNTPs）进行DNA合成。其中，ddNTPs是普通二进制核苷酸（dNTPs）的缺氧衍生物，与dNTPs类似，但它们在3'-OH末端没有3'-OH上的羟基，因此会使DNA链延伸终止。

反应分割：将合成的DNA片段通过凝胶电泳分离。DNA片段根据长度进行分离，并根据终止碱基类型（ddATP、ddCTP、ddGTP和ddTTP）的不同而产生颜色差异。

凝胶电泳：将反应产物注入聚丙烯酰胺凝胶，然后通过施加电场使DNA片段沿凝胶移动。由于凝胶中的孔隙大小不同，较短的DNA片段移动得更快，而较长的片段移动得更慢。

电泳结果分析：通过适当的检测方法，如荧光标记或放射标记，观察凝胶中DNA片段的分布情况。不同的碱基会产生不同的颜色或放射强度，因此可以确定DNA序列。

数据分析：通过分析凝胶电泳图像上的带状图案，可以确定DNA片段的顺序和长度。根据带的相对位置和颜色，可以推断DNA的碱基顺序。

链终止法测序是通过使用复制DNA链时终止碱基的特性，结合凝胶电泳技术，来确定DNA序列的一种方法。