逆转录PCR的实验步骤用到哪些试剂和仪器

一、实验器具与材料：

1、移液器：1ml、200μl、20μl、10μl、2μl

2、吸头：1ml、200μl、20μl

3、匀浆管：5ml

4、吸头台：放置1ml吸头的一个，放置20μl吸头的一个

5、EP管：1.5ml、0.2ml、100μl

6、试剂瓶：2个60ml的棕色试剂瓶（广口，带盖）；1个125ml的白色试剂瓶（放无水乙醇）

7、量筒：50ml、250ml、500ml

8、容量瓶：250ml、500ml、1000ml

9、试管架：5ml、1.5ml、20μl

10、盐水瓶：250ml、500ml各2个备用，一个装无水乙醇，另一个装DEPC水

11、铝制饭盒：4个

12、塑料小饭盒：1个

13、大瓷缸：2个

14、锡泊纸：一卷

15、卷纸：2卷

16、三角烧瓶：带盖，稍大

二、实验器具的处理与准备

1、塑料制品：（包括枪头、EP管、匀浆管等）

先将DEPC水从容量瓶中倒入瓷缸中，将塑料制品逐个浸泡其中，其中小枪头需要吸管打入DEPC水，过夜，然后高压，再烤干备用，实验前将枪头等放入吸头台，再高压一次（EP管）

2、玻璃制品：泡酸过夜，冲洗干净，蒙锡纸烤干备用（DEPC水泡）（洗净后先泡1‰DEPC过夜，再烤干）

3、匀浆器：（包括剪刀、镊子）先洗净后，再高压（不需要泡DEPC）

三、试剂配制：

1、DEPC水：吸出1ml放在1000ml双蒸水中配成1‰DEPC水，放在1000ml容量瓶中静置4小时备用。

2、75%乙醇：用无水乙醇?DEPC水配，然后放-20℃保存（其中DEPC水需先高压）

3、异丙醇：放入棕色瓶中

4、氯仿：放入棕色瓶中

5、琼脂糖

仅供参考